登陆注册
6723100000019

第19章 材料与方法

森林病虫害直接影响林木的正常生长和森林效益的发挥,特别是以杨树天牛为代表的蛀干害虫,是多种林木的毁灭性害虫,全国每年由此造成的直接经济损失约20亿元。宁夏引黄灌区一期防护林工程因天牛危害,树木几乎全部伐除,达8000多万株,损失惨重。因此,天牛危害已经成为我国林业生产和生态环境建设的重要制约因子,引起了众多学者的关注。现代害虫综合管理(IPM)中,一方面强调以营林为基础,利用树木本身化学成分与物理特性等对害虫寄主选择、交尾、产卵等等行为的影响,把抗虫树种、感虫树种(诱饵树种)、目的树种等多树种合理配置,营造混交林,提高林分的抗虫性和生态稳定性;另一方面又在树木及其他植物中寻找新型植物源杀虫活性物质,贴近绿色、环保的防治目标,这对林木抗虫机制的研究提出了更高要求。以林木——环境——害虫三者为系统,国内外学者相继进行了广泛的林木抗虫性研究,取得了一定成就,特别是近十多年来,对林木抗虫化学机制的研究也有了长足的发展。

林木抗虫性是林木育种和造林生产中的一个重要技术经济指标。抗虫植物具有一套化学防卫体系,是植物防御害虫的保护方式之一,普遍认为在抗虫植物中含有具有抗虫的化学物质。林木的拒虫性、抗生性、耐虫性均与这些化学物质密切相关,特别是随着我国人工林面积的不断增加和危害林木的天牛、松毛虫等主要害虫的不断蔓延,对林木抗虫性的研究和应用受到广泛关注,并涌现出众多研究成果。

抗虫化学物质包括营养物质和次生代谢物质,在林木和害虫的相互作用中起关键作用,二者产生的来源和性质不同。次生性产物是复杂的分之代谢途径的产物,不直接参与维持植物的生长发育和生殖有关的基础生化活动,一般也不作为昆虫的营养成分,但却能影响昆虫对寄主植物的选择、产卵等活动。营养物质和次生代谢物质共同影响昆虫的行为、生长发育和繁殖,但学者们对何者起主导作用还有不同的见解。

营养物质:有研究表明,葡萄糖含量增加,降低了试验用木麻黄木段的抗虫性;昆虫11种必须氨基酸含量低的马尾松品系对松毛虫的抗性较强;水分在叶、皮、木质部中含量较高,对黄斑星天牛取食有利;树皮含氮物质中蛋白质类所占的比例高,木质部C/N低有利于幼虫取食。营养物质糖类中还原糖的比例较高,对成虫和幼虫的取食有利。

次生代谢物质:有时也称之为他感化合物,是复杂的分之代谢途径的产物,主要有以下几种。

①异戊间二烯类:包括大量萜,特别是单萜、倍半萜、三萜(皂角苷、兹醇等)。如樟树茎含的樟脑(二环单萜)、桉叶含的桉树脑(单环单萜)、柑橘果皮中的萜类等,存在于树脂道和细胞壁中的树脂主要成分是倍半萜、双萜和三萜。研究证明,β-蒎烯、3-蒈烯、棉酚(棉毒素的主要成分)、葫芦素等至少有双重信使作用。其中有些具有改变昆虫行为、感觉、代谢、内分泌的效应,即具有利己素的作用;有些还影响昆虫发育、变态、生殖及寿命,香脂冷杉中即含有前两种。

②乙酰配体及其衍生物:主要是酚类、奈、奈醌、苯基羧酸类、苯丙烷衍生物(木质素、肉桂酸、香豆素等)及黄酮类化合物(懈皮酮、肉豆蔻醚、桑色素、D-儿茶酸等)、缩合单宁等。核桃科植物中含有的核桃酮具有利己素的效应。

③生物碱为含氮杂环化合物,为100科植物所含有,虽然其中一些具有拒虫性和抗生性,但其防御保护功能尚不普遍。

另外,糖苷、同工酶、蛋白酶类抑制剂等也与抗虫性有关。

抗虫树种中的抗虫化学物质(生物活性物质)普遍存在,起到了利己素的作用,主要有以下作用方式。

①产生能引起昆虫忌避或抑制其取食的物质,使觅食昆虫避开、离去或阻碍取食;

②产生阻碍昆虫对食物消化和利用的化学因素;

③改变昆虫所需营养成分的食量和比例,使之不利于昆虫的生长、发育和繁殖。

目前对林木抗虫性的分级和评价还缺乏系统性,不同树种对不同害虫的抗性评价标准难以统一,造成评价结果在某种程度上缺乏可比性。因此,应尽快构建符合林业特点的林木抗虫性科学分类表记体系,以便在生产中推广应用。对林木抗虫性概念已经有比较深刻认识与理解,但在实践中应注意林木抗虫性的相对性,其因树种、害虫、生长状况、立地环境、生长阶段条件而发生变化,所以在营林实践中要贯彻树种合理配置的原则,强调林分生态系统的稳定性。林木抗虫机制与其解剖结构、生理特性及内含化学物质等有关,而林木的抗虫活性物质具有广阔的开发利用前景。

臭椿是苦木科植物,原产我国北部和中部,现在中国大部分地区有分布,天然分布的臭椿主要以散生为主。臭椿皮是中国民间常用的中草药,具有清热、消炎、燥湿、止血、杀虫等功效,可用于治疗子宫出血、肠炎赤痢、膀胱及尿道炎症、淋病等。近年的研究表明臭椿根皮提取物具有抗阿米巴原虫活性,并有明显的抗肿瘤作用,可用于治疗宫颈癌、结肠癌、直肠癌等;吕金顺等(2002)从臭椿根皮分离得到两个新化合物,并利用现代波谱方法鉴定出其化学结构,生物活性试验表明,两个化合物对肝癌细胞和胃癌细胞均有抑制作用。本试验系统研究臭椿与其提取物对光肩星天牛幼虫生长发育、成虫取食与产卵的影响,并利用臭椿提取物及其主要活性成分的化学物质对光肩星天牛成虫进行毒杀与驱避试验,全面分析臭椿的抗虫化学机制,以期为营林实践、林木抗虫性研究及开发利用新型植物源杀虫物质提供参考。

(一)试验材料

8~10年生臭椿、合作杨幼树、2~3年生臭椿、新疆杨幼苗。7月份在宁夏大学农学院校园10~14年生新疆杨植株上捕获的光肩星天牛健壮成虫;11~12月自10~15年生合作杨虫害木采集的光肩星天牛幼虫,头宽4.63mm左右,体重2.18mg左右;臭椿水、乙醚提取物。

(二)试验方法

1.光肩星天牛幼虫饲喂试验

将臭椿、合作杨幼树树干中部截取的木段带树皮分别粉碎,根据试验的处理配方配制成人工饲喂食料。试验设6种饲料配方处理:1为合作杨饲料(CK);2合作杨:臭椿=4:1(为质量比,下同);3合作杨:臭椿=3:2;4合作杨:臭椿=2:3;5合作杨:臭椿=1:4;6为臭椿饲料。

选择1头健壮光肩星天牛幼虫放入装有适量饲料的培养皿(Φ=9.5cm)中在实验室喂养,培养皿上面用黑布覆盖遮光。每处理5次重复,每重复5头幼虫,每5~10d观测1次幼虫的体重。饲喂期间实验室温度为18℃~23℃,空气相对湿度41%~61%。

2.光肩星天牛成虫取食、产卵试验

(1)强制取食试验

在直径为12cm的培养皿中放新鲜臭椿叶片,放入1头天牛成虫,观察其取食情况;同时设榆树叶片、空白(不放食料)对比处理,每天更换1次叶片,10次重复。

在大广口瓶(高18cm,直径12cm)内置臭椿嫩枝叶,放入天牛成虫1对,观察其取食情况,同时设榆树嫩枝叶对照组。

在塑料桶(高31cm,直径30cm)内置臭椿木段(长28cm,直径8~10cm),底部垫湿土保湿,放3对天牛成虫,上盖纱网。3次重复,同时单独设置小叶杨木段(长28cm,直径8~10cm)为对照,测定木段强制取食试验。

在塑料桶内置小叶杨木段,喷施臭椿的水浸提物、乙醚提取物(2ml提取物+3ml乙醚+40mlH2O,每天9:00、17:00各喷施1次),底部垫湿土保湿,放3对天牛成虫,上盖纱网。3次重复。

试验过程中观测记录光肩星天牛成虫的着落、交尾等活动与死亡情况;试验结束后统计成虫在不同处理木段上的取食面积、产卵数量等。

(2)选择取食试验

在塑料桶内同时置榆树、臭椿嫩枝叶(插于水瓶中),放3对天牛成虫,上盖纱网。3次重复,进行选择取食试验。每天更换一次嫩枝叶。

在塑料桶内同时放小叶杨、臭椿木段,底部垫湿土保湿,上盖纱网。每桶放3对天牛成虫,3次重复。

在塑料桶内小叶杨木段两根,一根每天喷施两次臭椿嫩枝叶的水浸提物,另一为对照(喷清水),底部垫湿土保湿,上盖纱网。每桶放3对天牛成虫,3次重复。

在塑料桶内同时放小叶杨木段两根,一根每天喷施两次臭椿嫩枝叶的乙醚提取物(2ml提取物+3ml乙醚+40mlH2O),另一为对照(喷3ml乙醚+40mlH2O);底部垫湿土保湿,上盖纱网。每桶放3对天牛成虫,3次重复。

试验期间,每天8:00~20:00间,每隔2h观察记录各木段上虫次数、交尾频次等,试验结束后统计其取食面积比例、刻槽数、产卵数等,各试验持续时间为7~10d。将卵夹在湿润滤纸中放入培养皿置于室温黑暗环境中观测其孵化情况。

3.驱避试验

(1)测定装置

结合文献报道的害虫嗅觉测定装置的基础上,根据光肩星天牛成虫的形体特点与飞行能力,将释放虫管臂直径增大、长度延长,并在管臂内设置虫道,改进自制成光肩星天牛风洞驱避测定装置。将“Y”形风洞驱避测定装置向上倾斜15°,管内放置由细树枝制成的虫道,向上倾斜4°~8°;在室温下,用抽气扇抽气(电压80伏),使空气均匀缓慢流动以便测定。

驱避测定装置的技术指标:抽气扇直径23cm,“V”形纸筒长50cm,释放管和“Y”形管臂长均为100cm,引虫孔规格为4cm×6cm,观察道宽5cm,观察透光孔规格为4cm×5cm,味源瓶高18cm,直径10cm。

(2)测定方法

将装好活性炭的过滤瓶等用胶皮管连接封好,以便测定时过滤空气,补充新鲜洁净气体。每个管臂用橡皮管各自连接一味源瓶,一个用于空白对照(脱脂棉球上注蒸馏水),另一个用于放置注有提取物的脱脂棉球。

挑选活力强、足和触角等完整的天牛雌雄成虫,将每头光肩星天牛成虫从引虫口用一小木棍引上虫道,记录进入两管臂天牛的数量。在虫道上或释放管内停留不活动的记无效,每种剂量3次重复,每重复10头天牛。每重复一次完毕要除去管臂内残留的有效气味,调整Y形管臂的方向,以消除几何位置对天牛行为可能产生的影响。

(3)模拟林分驱避试验

根据臭椿提取物成分分析结果,结合林木抗虫化学物质文献报道,筛选确定几种活性物质,自日本购买标样物质进行模拟林分内的驱避试验。标样编号1#~10#,DL-Camphene(茨烯),DL-Camphor(樟脑),β-Caryophyllene(β-丁香烯),Geraniol(香叶醇),DL-Limonene(柠檬烯),Myrcene(香叶烯),α-Pinene(α-蒎烯),β-Pinene(β-蒎烯),α-Terpineol(α-萜品醇),α-Terpinene(α-萜品烯)。

人工模拟林分选用白榆(Ulmus pumila)侧枝(干径3~5cm,高170~200cm,冠幅50~100cm)20株,在实验室内进行,株行距50cm×50cm,共5行,每行4株,将其插入装满水的广口瓶内固定在铁凳,室内加湿防止植株水分散失,在模拟林分中均匀选定3株为标样处理株,另设3株对照。在处理植株冠部挂一棉球,注入标样液0.8ml,对照注蒸馏水。释放光肩星天牛成虫3雌3雄到处理株与对照株上。定时观察记录天牛成虫活动情况,以处理和对照植株上着落的成虫数来判断某一标样化学物质对天牛成虫的驱避作用。

4.毒杀试验

(1)提取物

将臭椿嫩枝叶、幼果等器官采用不同有机溶剂浸泡、提取,从而获得提取物。其提取物有浸提液(浸泡24h过滤)、粗提液(浸泡后蒸馏)、精提液(浸泡、蒸馏后再回收有机溶剂)三种类型。毒杀试验采用的提取物有乙醇浸提液、苯浸泡提液、水粗提液、水浸提液、乙醚浸提液、丙酮浸提液等。

(2)标样化学物质

与驱避试验相同,采用购置的几种标样化学物质作毒杀,以便与提取物对比和分析,筛选杀虫活性物质。

(3)毒杀方法

在直径95mm、高15mm的培养皿内放一小棉花团,注入2ml的提取物后将天牛成虫置于其内,盖上盖,按时观察记录天牛的反应、死亡时间等。每种提取物均设有对照,3次重复,每重复5头成虫。标样化学物质的用量为0.2ml。

同类推荐
  • 农作物测土配方施肥技术

    农作物测土配方施肥技术

    《农作物测土配方施肥技术》主要介绍了农作物合理施肥原理、测土配方施肥技术以及小麦、玉米、水稻、甘薯、棉花、油菜、花生、大豆、烟草、茶树等农作物的测土配方施肥技术等内容。主要农作物测土配方施肥技术从农作物需肥特点与常见缺素症补救措施、农作物科学配方与施肥技术以及特用作物科学施肥技术等着手,把测土配方施肥与农作物施肥有机结合起来,便于农民在生产实践中应用。
  • 四季养花大全

    四季养花大全

    《四季养花大全》依季节特性,详细阐述养花、护花的方法,内容科学、实用而富于生活化。本书不仅对四季养花的要点,如水、肥、土壤、花盆、修剪、病虫防治等,进行了综述,而且选取了每一季中最常见、最需要注意的花卉品种,以图解的形式,进行了有针对性的详细说明。《四季养花大全》还精心收集了养花过程中常见的问题,以问答的形式呈现给读者,并在附录中作索引,以方便读者查找和阅读。
  • 植物奥秘

    植物奥秘

    本书以通俗易懂的语言阐述了植物世界里的一些未解之谜,并进行不深入浅出、科学严谨的解析。
  • 农业实用技术(农经政策卷)

    农业实用技术(农经政策卷)

    本书针对农民朋友在农村土地承包和国家就有关农民、农村、农业“三农”法律法规及政策方面,以及农民专业合作社方面遇到的实际问题用问答的形式作了详细、具体的解答。如土地如何正确流转,农民专业合作社社员的权利与义务,林地承包如何流转、山林自己是否可以砍伐等等。
  • 现代养殖实用技术

    现代养殖实用技术

    《现代养殖实用技术》对家禽、牛羊、水产以及其他经济动物的现代养殖技术进行了概括性、针对性地阐述,帮助您全面了解现代养殖的实用技术,帮助您确定最适合自己的养殖方向。
热门推荐
  • 午夜控妖师

    午夜控妖师

    被遗弃的天才报名参加妖灵高校,因为没有人发现他的天资,所以在高校饱受非人般的折磨,在这段期间里认识了一个又一个的朋友兄弟,你们应该听说过道士、高僧、阴阳人、灵探、风水师、算命先生、招魂师、相师、赶尸人、守陵人等职业,可我哪个都不是,我是一个控妖师!
  • 星夜传说之巅峰王者

    星夜传说之巅峰王者

    他们是一群原本生活快乐的人群从来没有对生活失去过信心亦无对未来的道路产生过迷茫却有人在没有经过他们的同意下,把他们从各自的世界中集合到这个神秘的空间,将他们抛入一个又一个世界里面,经历不同的世界,不同的事件,不同的文明,他们所需要做得就是完成它交代的任务在这里,不能变强,就要死亡
  • 警花来袭之将军请接招

    警花来袭之将军请接招

    他,武侯之子;他,将帅领首;他,韩成义,赵国最强将领。她,黑鹰队副队长;她,穿杨百步英勇无畏;她,就是乜离。两个不同维度,不同时间,不同空间的人,原本两个根本不可能相见的人,却在一次阴差阳错之下遇见。一个生死瞬间的爆炸,使乜离在不知不觉间,来到了这个战乱四起,人人自危的地方。为了活命,她加入了林铁军。出众非凡的她终于看到了那位传说中的将军。战场厮杀,铁血丹心,敢勇的身姿令他赞赏,爱慕。她本不想与这个不属于自己的世界有过多的联系,但事与愿违,一次的无意之下,她救了他,就这样他们之间的命运就在此联系在了一起。两人的命运到底如何,他们能否化险为夷?
  • 堕天羽

    堕天羽

    域外生灵,虎视眈眈;禁区之主,伺机而动。少年林羽经历千锤百炼,只为守护心中那片天地。“天道无情,吾便堕天!”残阳似血,林羽悲愤又苍凉的咆哮声,回荡在整片战场上空。
  • 甜心丫头的暖心校草

    甜心丫头的暖心校草

    “我同意。”夏忆欣,你为什么要答应?一门荒唐的亲事,三家名门的晚辈,一场让人心痛的三角恋,谁将何去何从?“夏忆欣,对不起,我早已经不是你的哥哥了,我也不想做你的哥哥了!”“离开胜,和我在一起!”“我要做你男朋友!”“对不起…我……”
  • 衣香魅影

    衣香魅影

    陈依然,服装设计师,工作在大上海的小白领。因为一张巴黎时装秀的入场券而改变了命运。小白领也有大梦想。陈依然的梦想是成为一名优秀的服装设计师,有一天甚至能走向国际大舞台。在巴黎陈依然遭遇了一系列的落难,幸得阿南的帮助。阿南爱上了可爱而简单的陈依然。陆松凡,非凡集团年轻的董事长,众多女人的梦中情人。这个外表成熟英俊的男人,却有一颗冷峻的心。陆松凡一直封锁着自己的感情。苏子琪是苏氏集团的掌上明珠,苦苦爱着陆松凡三年而不果。嫉妒冲昏了苏子琪的理智,她策划了一场商业阴谋使非凡集团陷入巨大的危机。陆松凡能否带领非凡集团走出危机?陆松凡的爱情会何去何从?各种爱恨情仇都在这里上演。
  • 秒杀订单

    秒杀订单

    本书是为在销售工作中停滞不前、渴望有进一步提升的销售人员和初人销售行业、不知如何拓展自己业务的新手们量身打造的。全书包含如何掌握秒杀订单的策略、如何透析客户肢体语言背后的信息、如何利用成交术促使秒杀成功等八章内容,循序渐进地为读者作出分析和详细解答,并提供了极具参考价值的方法和建议,教你如何用更小的成本获得更大的销售额,用更短的时间获得更多的订单,让你一天一天向销售冠军的目标快速靠近。如果你正奋战在销售第一线,本书会解答你的销售困惑,让你准确把握秒杀订单的秘诀,从一名销售新人成为一名成绩斐然的销售冠军!
  • 穿越之驸马别想逃

    穿越之驸马别想逃

    她是大齐国唯一的嫡出公主,身份尊贵。他是镇国将军府的少年将军,地位显赫。他们是皇帝赐婚的未婚夫妻,可谓天造地设、珠联璧合。然而,在他眼中,她是被皇帝养废了的废物公主,嚣张跋扈、仗势欺人。在她眼中,他是被将军宠坏了的一介莽夫,愚昧无知、狂妄自大。可是到了后来他知道她蕙质兰心、巾帼须眉。她知道他骁勇善战、足智多谋。她说:皓轩,待我长发及腰,你娶我可好?他说:秋画,今世能得你相伴左右,此生足矣!可是他们终究拧不过帝王权术,逃不脱有心人阴谋陷害。她说:皓轩,我本无所求,只希望有朝一日嫁你为妻,相夫教子,但是他们害你,我就要倾覆了整个天下为你陪葬。有志者事竟成,苦心人天不负。君子报仇十年不晚。十年后,她入朝堂,上战场,弄权术,搅风云。且看二十一世纪金牌女特工恢复本性,冷心绝情,怎样把一众古人玩弄于鼓掌之中。本文女强一对一爽文,坑品保障,欢迎跳坑。亲们的收藏、点击、评价、钻石、鲜花,都是燕回写作的动力,希望大家多多支持,燕回必以十二分的精力写好每一个章节,回报大家。
  • 仙魔凡

    仙魔凡

    九洲大陆,仙门无数。王族族长幼子欲下界修行。
  • 十方幻灭

    十方幻灭

    天地劫,十方寂灭。神州大地,浩浩无边,传说开天辟地之初,有神明创造万物,亦有妖魔毁灭生灵。这期间便有了许多用于创造和毁灭的器物,世人为之争斗厮杀在所多有,而这个故事便是从西域魔神留下的异宝开始的。