登陆注册
6035600000014

第14章 基因克隆的载体——质粒和噬菌体

1.质粒

质粒是基因工程最常用的运载体,它广泛地存在于细菌中,是细菌染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子,大小只有普通细菌染色体DNA的百分之一。常用作基因工程中的运载体。可以将目的基因整合到质粒上然后导入受体细胞。由于质粒很小,所以能很顺利地通过细胞壁。质粒可以从细菌细胞中提取,也可以从酵母菌中找到。

质粒上常有具有抗生素的抗性基因,例如,四环素抗性基因或卡那霉素抗性基因等。有些质粒称为附加体,这类质粒能够整合细菌的染色体,也能从整合位置上切离下来,成为游离于染色体外的DNA分子。质粒在宿主细胞体内外都可以进行复制。

目前,已发现有质粒的细菌有几百种,已知的绝大多数的细菌质粒都是闭合环状的DNA分子。细菌质粒的相对分子质量一般较小,约为细菌染色体的0.5%~3%。每个细胞中的质粒数主要取决于质粒本身的复制特性。按照复制性质,可以把质粒分为两类:第一类是严紧型质粒,当细胞染色体复制一次时,质粒也复制一次,每个细胞内只有1~2个质粒;另一类是松弛型质粒,当染色体复制停止后仍然能继续复制,每一个细胞内一般有20个左右的质粒。这些质粒的复制是在寄主细胞的松弛控制之下的,每个细胞中含有10~200份拷贝,如果用一定的药物处理抑制寄主蛋白质的合成还会使质粒拷贝数增至几千份。如较早的质粒pBR322即属于松弛型质粒,要经过氯霉素处理才能达到更高的拷贝数。一般分子量较大的质粒属严紧型,分子量较小的质粒属松弛型。质粒的复制有时和它们的宿主细胞有关,某些质粒在大肠杆菌内的复制属严紧型,而在变形杆菌内则属松弛型。

2.噬菌体

我们经常听说噬菌体,那噬菌体到底是一种什么东西呢?它要吞噬什么?其实,噬菌体是一类病毒,原指细菌病毒,近年来发现真菌、藻类都有噬菌体。噬菌体体积微小,只有在电子显微镜下才能看见,是一种非细胞结构的生命,只有进入宿主细胞才具有生命特征,并具有寄主专一性。其结构简单,包括蛋白质外壳和包裹在中间的遗传物质——一个单一的核酸分子(DNA或RNA)。在遗传上研究得较清楚的是大肠杆菌的T系噬菌体,它看起来像蝌蚪,只有它的寄主大肠杆菌体积的1/1000,每个噬菌体大约由等量的蛋白质和DNA组成。它的双股DNA分子包在蛋白质外壳里,形成“头部”,“尾部”则由几个不同的部分组成:有领、髓、鞘、基盘、尾钉和尾丝,它们都是由蛋白质组成。就噬菌体与宿主的关系而言,可分为烈性噬菌体和温和噬菌体两大类,从脾气上就可以看出他们的不同来。烈性噬菌体感染宿主细胞时,例如大肠杆茵的T4噬菌体以其尾部吸附在细菌表面上,然后将其遗传物质DNA注入寄主细胞内,借用寄主的代谢机器复制噬菌体的DNA和合成噬菌体的蛋白质,然后利用寄主作为生产车间,将这些DNA和蛋白质组装成许多新的噬菌体,这时噬菌体通过宿主细胞的裂解而释放出来,以后这些新的子代噬菌体又去感染附近的细菌,并将它们裂解,如此反复分解,吞噬,结果便在长满细菌的平板培养基上,形成一个不长细菌的透明斑,就是噬菌斑。而温和噬菌体在侵入宿主细胞后,其DNA可以和宿主细胞的染色体和谐共处整合在一起,并与宿主细胞同步复制,宿主细胞并不裂解。遗传学上经常把噬菌斑的形态和噬菌体的宿主范围作为噬菌体的研究性状,不同的噬菌体所形成的噬菌斑是不同的,噬菌斑有大和小、边缘清晰与模糊之分。拿宿主范围来说,有些细菌不受噬菌体的吸附,而噬菌体能感染和裂解的细菌菌株也可以不同。噬菌体的基因重组是首先在大肠杆菌噬菌体T2中发现的,让两个T2噬菌体的不同突变体同时感染大肠杆菌,两种类型的噬菌体DNA在宿主细胞内可以发生基因重组,从而产生重组类型的子代噬菌体。根据重组噬菌斑数与总噬菌斑数之比,就能够算出基因的重组率。通过T2噬菌体的不同品系的杂交试验,可以知道T2噬菌体的连锁图是环状的。另外,还可以将噬菌体作为媒介,使细菌间的遗传物质得以传递、交换和重组,在这一过程中,细菌的一段染色体被包在噬菌体的蛋白质外壳内,并通过感染而转移到另一受体细菌内,从而使细菌产生基因重组。

同类推荐
  • 恐龙科考百科(科学探索百科)

    恐龙科考百科(科学探索百科)

    人类社会和自然世界是那么丰富多彩,使我们对于那许许多多的难解之谜,不得不密切关注和发出疑问。人们总是不断地去认识它,勇敢地去探索它。虽然今天科学技术日新月异,达到了很高程度,但对于许多谜团还是难以圆满解答。人们都希望发现天机,破解无限的谜团。古今中外许许多多的科学先驱不断奋斗,一个个谜团不断解开,推进了科学技术的大发展,但又发现了许多新的奇怪事物和难解之谜,又不得不向新的问题发起挑战。科学技术不断发展,人类探索永无止境,解决旧问题,探索新领域,这就是人类一步一步发展的足迹。
  • 自然密码百科(奥秘世界百科)

    自然密码百科(奥秘世界百科)

    宇宙天地和自然世界真是丰富多彩、纷繁庞杂,使我们对于那许许多多的难解之谜,不得不密切关注和发出疑问。人们总是不断地去认识它,勇敢地去探索它。虽然今天科学技术日新月异,达到了很高程度,但对于许多奥秘还是难以圆满解答。人们都希望发现天机,破解奥秘。古今中外许许多多的科学先驱不断奋斗,一个个奥秘不断解开,推进了科学技术的大发展,但又发现了许多新的奥秘现象,又不得不向新的问题发起挑战。正如达尔文所说:“我们认识自然界的固有规律越多,这种奇妙对于我们就更加不可思议。”科学技术不断发展,人类探索永无止境,解决旧问题,探索新领域,这就是人类一步一步发展的足迹。
  • 海洋知识趣味小百科

    海洋知识趣味小百科

    近几年来,科普的观念已出现了较大的变化,以前说到科普,主要是灌输讲解式的科学知识普及,但现在更需要的是“公众理解科学”科学传播的思想,强调科学家(或专家)与公众的平等、双向对话;强调交流科学精神、科学思想、科学方法、科学的社会作用;强调科普的文化性、娱乐性、时尚性、探奇性、情感、审美、体验性和可视性等特点。
  • 中国近代民族化学工业的拓荒者:侯德榜的故事

    中国近代民族化学工业的拓荒者:侯德榜的故事

    本书中介绍了科学家们独立思考、敢于怀疑、勇于创新、百折不挠、求真务实的科学精神和他们在工作生活中宝贵的协作、友爱、宽容的人文精神。使青少年读者从科学家的故事中感受科学大师们的智慧、科学的思维方法和实验方法,受到有益的思想启迪。从有关人类重大科技活动的故事中,引起对人类社会发展重大问题的密切关注,全面地理解科学,树立正确的科学观,在知识经济时代理智地对待科学、对待社会、对待人生。阅读这套丛书是对课本的很好补充,是进行素质教育的理想读物。
  • 日常小事皆学问

    日常小事皆学问

    科技人才的培养,基础在于教育。谁掌握了面向未来的教育,谁就能在未来的国际竞争中处于战略主动地位。青少年是祖国的未来,科学的希望,担当着科技兴国的历史重任。因此,把科技教育作为一项重要的内容,从小学抓起,为培养未来的人才打下坚实基础是势在必行。
热门推荐
  • 情人眼

    情人眼

    江绿汀是个外表柔弱内在却很坚强独立的女生,即使遭遇生活中种种挫折,却依旧执着前行。直到有一天她发现,身边那个一直打击她毒舌的男人,也是一直在暗中默默守护的人时,他们的爱情,会开花么?
  • 高达之创世

    高达之创世

    既然这个世界如此的扭曲,那么只好重新来过
  • 傲娇女王,贵少惹不起

    傲娇女王,贵少惹不起

    [停更,筹备新书中】如果有一天你在酒吧看见一位美得‘不知天高地厚的’的美女手里拿着一杯烈酒,而且还在调戏着几位美男的话,就赶快打电话给漠少吧。世人皆知,漠少嗜血无情,而且特别讨厌酒。但偏偏爱上了爱美男,嗜酒如命的一线影后------唐雅若。从此高冷闪一边。群号519628160
  • 惊艳女神:魔域女王圣下

    惊艳女神:魔域女王圣下

    她是罗氏宠爱一生的公主,是学校公认的校花,是人人所拥戴的女神,她的容貌无人可以媲美。而她,还有一个身份,便是不同于常人的魔域之人。她,为了自己一个夙愿,拥有了魔力,为他人实现夙愿,并且还有着别人没有的俩只可爱精灵。他,邪恶冷漠,偶然将她救下,可却是怀有目的地接近她,她不屑于他的帮助,还对他的虚伪感到愤怒!他仅仅是有着自己的目的,可他竟发现自己对她产生了兴趣!他们经历过千辛万苦,但最后是否能够两厢情愿,永远走下去?
  • 位面之最强召唤师

    位面之最强召唤师

    这是一个只为了寻找回家之路的男人,一次又一次的打破时空的界限,想要寻求回家路的故事。火影忍者:参谋长【夜神月】主攻【蓝染物右介】防御【白羊座‘史昂’】天龙八部:参谋长【待定】主攻【风云:雄霸】防御【待定】靓女幽魂:参谋长【待定】主攻【待定】防御【待定】X战警:参谋长【待定】主攻【待定】防御【待定】蜀山:参谋长【待定】主攻【待定】防御【待定】钢铁之躯:参谋长【待定】主攻【待定】防御【待定】复仇者联盟:参谋长【待定】主攻【待定】防御【待定】漫威VS【DC】:参谋长【待定】主攻【待定】防御【待定】漫威之最强召唤师前传,不多说了,进来看看吧。
  • 致郁之世

    致郁之世

    这个世界,有太多的东西,具有很大的吸引力,对人,对物。这个世界,吸引着人,同样的,也有太多的东西,使人消极堕落。如果世界封闭了天空,我只有堕落。致郁之世,堕落的人。
  • 暮景流年,陌奈何

    暮景流年,陌奈何

    暗夜,她一袭长裙,跌撞奔跑;他隐匿在黑暗中,追随她的脚步,勾唇邪笑。“你别过来”眸中流露出惊恐,她看到身后的男人绝望地撕声呐喊。“陌宝贝,我在这,你还想逃去哪?”逆着月光,他从黑暗中走出,浑身散发着来自地狱的气息,将她束缚。“放过我……求你……啊!”下颚勾起,女人凄厉的惨叫声,划破苍穹,泪,终究落下。为什么!为什么不肯放过她,我只是爱你,难道这也有错?为什么在我决定离开时,你又将我困在你身旁。看着女人痛苦的表情,他眸色顿暗。“放过你?”俯身,他咬住她的颈,嗓音一如既往的好听,如来自地狱的吸血鬼奏响魔咒:“除非我死!”执念似魔,一点点燃烧,一寸寸成灰,既然我为你入魔,那么,就罚你用一生来渡我!
  • 和魔女说说爱(爆笑校园)

    和魔女说说爱(爆笑校园)

    魔女竟在多年后重逢了她的人鱼王子!“纪紫!”这个名字谁叫都行,只有那个从小就纠缠的恶魔不能叫,她的退隐剑道大赛被这个突然杀出的冤家搅得一团乱,即将开始的高中生涯被这个恶魔完全颠覆,就连唯一平静的家,也被他收买爸妈无赖进驻。就在与他斗智斗勇、鸡飞狗跳的生活中,突然出现的心仪男孩,让她知道了什么是喜欢一个人的滋味,沉浸在甜蜜幸福中的她,却在那天蓦然回头的一霎,发现他竟是那样的消瘦憔悴,那总是溢满温柔浅笑的脸颊,透着让人揪心的悲伤……
  • 赵太祖三下南唐

    赵太祖三下南唐

    本书为公版书,为不受著作权法限制的作家、艺术家及其它人士发布的作品,供广大读者阅读交流。
  • 福妻驾到

    福妻驾到

    现代饭店彪悍老板娘魂穿古代。不分是非的极品婆婆?三年未归生死不明的丈夫?心狠手辣的阴毒亲戚?贪婪而好色的地主老财?吃上顿没下顿的贫困宭境?不怕不怕,神仙相助,一技在手,天下我有!且看现代张悦娘,如何身带福气玩转古代,开面馆、收小弟、左纳财富,右傍美男,共绘幸福生活大好蓝图!!!!快本新书《天媒地聘》已经上架开始销售,只要3.99元即可将整本书抱回家,你还等什么哪,赶紧点击下面的直通车,享受乐乐精心为您准备的美食盛宴吧!)